苋籽油中角鲨烯的反相高效液相色谱测定方法开发与验证

《BMC Chemistry》：A rapid and green HPLC method for squalene determination in amaranth oil using a polar-embedded stationary phase and ethanol mobile phase

摘要开发并验证了一种反相高效液相色谱（RP-HPLC）方法，用于定量测定苋籽油中的角鲨烯。作为初步步骤，在八种具有不同键合固定相的色谱柱上评估了苋籽油成分的色谱分离效果，包括C8、苯基、五氟苯基（PFP）和极性嵌段相。在测试的色谱柱中，具有嵌段极性基团的Supelcosil LC-ABZ色谱柱（150 × 4.6 mm，5 μm）相比传统C18色谱柱提供了最佳的選択性和更短的分析时间。通过改变乙醇含量优化了流动相组成，最终含有91%乙醇的流动相可实现角鲨烯的高效分离，保留时间约为5分钟。通过与α-生育酚醋酸酯的分离（Rs = 5.7）以及与油脂甘油三酯的良好分离度（Rs = 9.3）确认了方法的選択性。验证研究表明该方法具有良好的重复性和中间精密度，相对标准偏差不超过1.0%。证实溶液稳定性可达20小时，峰面积变化低于0.1%。由于玉米油的脂肪酸组成与苋籽油相似，因此选用玉米油作为验证基质，以确保对基质效应的评估具有相关性。所开发的RP-HPLC方法适用于准确、精密、可靠地测定苋籽油中的角鲨烯，提供了一种快速且环保的分析方法。