耐药肺炎克雷伯菌噬菌体的表型特征表征及体内初步评估

《BioTech》：Phenotypic Characterization and Preliminary In Vivo Evaluation of a Locally Isolated Klebsiella pneumoniae Bacteriophage

耐药性肺炎克雷伯菌是严重的临床问题，噬菌体正被重新研究作为一种抗菌剂。本研究描述了一株在本地从耐药性临床肺炎克雷伯菌菌株中分离的噬菌体vB_Kpn_NIIPB-V0006的表型特征及其体内初步评估。该噬菌体的基因组未进行测序，因此未对其是否含有溶原性相关基因、毒素、毒力或抗微生物耐药基因进行筛查。以下结果描述的是该噬菌体做了什么，而非它是否适合作为治疗手段。我们评估了噬菌斑形态、特异性裂解活性、效价、在有限非靶标面板上的宿主范围、颗粒形态、吸附情况、一步生长曲线、氯仿暴露敏感性、噬菌体抗性宿主变异体的出现频率、内毒素降低效果、小鼠的短期安全性以及豚鼠体内的抗菌效果。该噬菌体裂解了靶菌株，Appelman活性为10??，效价为1.7 × 1011 PFU/mL。经1-辛醇处理后，内毒素含量从1200降至12 EU/mL，同时保留了80%的感染活性。腹腔注射该制剂的小鼠在14天内无死亡，未见明显急性毒性。在系统性肺炎克雷伯菌感染的豚鼠模型中，存活率为主要观察终点：每日三次、每次0.5 mL的给药组存活率为6/6，而未治疗对照组仅为1/6（*p* = 0.015）。脾脏细菌负荷为次要观察终点，该组同样较低（2.64对4.41 log?? CFU/g）。该实验设计的两个特征使得这第二个比较偏向有利于治疗组，因为存活者和非存活者在不同时点取样，且噬菌体残留在涂板步骤中可能降低了菌落计数。因此1.77 log??的差异应视为上限值。该噬菌体值得进一步研究，但在作出任何治疗性声明之前，均需进行全基因组测序、确认宿主物种、针对多样化的临床分离株开展宿主范围测试，以及进行与抗生素治疗的对照比较。