还在为原代细胞计数头疼？掌握这几点轻松搞定

当你完成外周血单个核细胞（PBMC）分离，进行细胞计数后，往往会对计数结果心存疑虑：计数数值低于预期、细胞活率异常偏高，或是连续两次测量结果差异巨大。对于所有操作原代细胞的科研人员来说，这种不确定性十分常见。

与稳定细胞系不同，原代细胞存在诸多难以控制的变量：供体个体间的生物学差异、混合细胞群体，以及分离过程给细胞带来的应激损伤。原本一套对细胞系十分奏效的计数方案，用到原代细胞上时常会失效。

本文将介绍几类关键原代细胞（PBMC、干细胞、免疫细胞）计数的主要难点，以及对应的实操解决办法。

原代细胞计数难度更高的原因

原代细胞：复杂的生物异质性样本

不同原代细胞的特有难点与处理方案

不同原代细胞计数的难点各不相同，主要问题随细胞类型变化，解决方案也随之不同。

染色方法对比：适配原代细胞

染色方法直接决定原代细胞计数准确度。台盼蓝操作便捷，但针对大小差异大、经历分离应激的细胞，荧光染色结果更加可靠。

原代细胞计数前的检查清单

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总结

原代细胞计数比细胞系难度更高，因为生物学个体差异、分离操作带来的变化都会直接体现在检测结果上。不存在一套通用标准方案适配所有细胞类型，需要针对每种细胞，摸索合适的染色方式、粒径阈值、检测时间点。

实操上把握三点即可解决大部分问题：清楚所用细胞的粒径范围；考虑改用 AO/PI 荧光染色；养成同时查看计数数值与样本图像的习惯。做好以上几点，绝大多数原代细胞计数误差都可以得到改善。

参考文献

1. Böyum A. Isolation of mononuclear cells and granulocytes from human blood. *Scand J Clin Lab Invest*. 1968;21(Suppl 97):77 89.

2. Strober W. Trypan blue exclusion test of cell viability. *Curr Protoc Immunol*. 2015;111:A3.B.1 A3.B.3.

3. Louis KS, Siegel AC. Cell viability analysis using trypan blue: manual and automated methods. *Methods Mol Biol*. 2011;740:7 12.

4. Stoddart MJ. Cell viability assays: introduction. *Methods Mol Biol*. 2011;740:1 6.

5. Dominici M et al. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. *Cytotherapy*. 2006;8(4):315 317.

6. Stem Cell Technologies. Technical Manual: Ficoll Paque density gradient centrifugation. 2022.

内容源于Logos官网，如感兴趣请点 Why Is Counting Primary Cells So Difficult? 查看。

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