细胞调亡  
     
DeadEnd™比色法细胞凋亡检测系统在病理学中的应用
Promega公司:Martha O'Brien,Angela Okragly:威斯康星大学医学院:Tom Warner,Ron Kalil
荷兰脑研究所:
Guus Wolswijk
   

摘要
    由于细胞凋亡在发育、维持内环境稳定以及多种疾病状态中都扮演重要角色,所以细胞凋亡在遗传、分子及形态学等诸方面的研究成为热点。Promega公司的DeadEnd™比色法细胞凋亡检测系统能标记片断化的DNA,而这种片段化的DNA被视为是细胞凋亡的典型生化特征之一。DeadEnd™比色法细胞凋亡检测系统是一种在组织切片与培养细胞中标记凋亡细胞核的理想方法,与此同时,还可以做形态学上的评估。本文中,将展示此种方法在细胞凋亡的原位细胞, 动物模型及多种病理学组织切片中的应用。

引言
    细胞凋亡是一种细胞自杀机制,是一种在发育、内稳态及许多疾病过程中扮演着极为重要角色的生物学事件。以一种精确而且系统化的方法剔除多余的细胞是一般的发育过程的重要方面。因此,此过程又称为细胞程序性死亡(programmed cell death)。然而,在多种疾病中,细胞死亡程序可能会出现错误。退化性疾病可能导致细胞过量凋亡(或为过量细胞凋亡的结果),而一些癌症则好似抑制细胞死亡的发生而导致过量、失控的细胞繁殖。 
    最初,细胞凋亡是以形态学变化来定义的,如细胞体积的减小,细胞核的浓缩,细胞膜气泡等。经历细胞凋亡的细胞破裂成为膜包被的凋亡小体,然后轻易地被巨噬细胞或其他邻近的细胞吞噬并消化而不产生炎症反应。以上特征与因受剧烈刺激而产生的细胞坏死不同,后者的特点是细胞膨胀,溶酶体酶的释放以及细胞解体炎症反应等。
    多种细胞类型均可以发生细胞凋亡,凋亡可以为多种胞外刺激物所激发。人们在许多物种的细胞中发现了保守的致死基因,细胞死亡通路的研究也成为热点。在凋亡细胞的核中可以观察到形态学变化,DNA

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图1.DeadEnd™比色法细胞凋亡检测系统实验流程

 

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