miRNA研究导航（一）：miRNA的纯化

miRNA在许多生物过程中扮演了重要角色，包括分化和发育、细胞信号通路以及对感染的反应。大量的证据表明，miRNA表达的失调是一些疾病过程（包括许多癌症）的起因或指示剂。miRNA研究的成功依赖于高性能工具和技术的使用。QIAGEN是一个一站式供应商，满足您在miRNA纯化、定量和功能鉴定上的所有需求。

microRNA（miRNA）是天然存在、长约22个核苷酸的非编码RNA，它们介导了转录后的基因调控。miRNA在许多生物过程中扮演了重要角色，包括分化和发育、细胞信号通路以及对感染的反应。大量的证据表明，miRNA表达的失调是一些疾病过程（包括许多癌症）的起因或指示剂。研究还发现血清和血浆中可以检测到循环miRNA，且它们的表达因疾病而异，这一发现说明循环miRNA的表达特征可作为疾病诊断和预防的生物标志物，具有巨大潜力。

miRNA研究的成功依赖于高性能工具和技术的使用。QIAGEN是一个一站式供应商，满足您在miRNA纯化、定量和功能鉴定上的所有需求。欢迎访问QIAGEN的GeneGlobe® 网页（www.qiagen.com/GeneGlobe），订购miRNA特异的产品，并发现大量宝贵的基因信息、通路信息和生物信息学工具。

QIAGEN提供了以下方案：

一、miRNA纯化
利用miRNeasy Kits和PAXgene® Kits纯化高质量总RNA，包括miRNA。

二、miRNA表达谱分析
利用miScript® miRNA PCR Arrays快速分析整个miRNA组（miRNome）或通路聚焦的miRNA分析板

三、miRNA生物发生和调控研究
利用miScript PCR System同时定量成熟的miRNA（联合miScript Primer Assays）、前体miRNA（联合miScript Precursor Assays）和mRNA目标（联合QuantiTect® Primer Assays）。

四、miRNA功能分析
利用miScript miRNA Mimics、Inhibitors和Target Protectors确定miRNA的功能。

miRNA的纯化

高质量miRNA纯化

高质量的总RNA（包括miRNA）的纯化，是成功的miRNA定量实验的前提条件，因为质量不佳的RNA会阻碍酶促反应，且小RNA的低效纯化会导致不准确的结果。为miRNA纯化而推出的miRNeasy 和PAXgene miRNA Kits 确保您的实验有最高质量的RNA。miRNA产量优于其他miRNA纯化方法，如苯酚抽提和沉淀。如有必要，miRNA纯化也可在QIAcube®或QIAsymphony® 仪器上自动开展（如需更多信息，请访问www.qiagen.com/automation）。

总RNA的纯化或miRNA的富集

miRNeasy 和PAXgene miRNA Kits 可纯化总RNA，包括~18 nt以上的RNA。另外，对于所有样品类型，除包含严重降解RNA的样品（如FFPE组织）和包含少量大RNA（如血清/血浆样品）的样品外，miRNeasy Kits可分别纯化富含miRNA的组分（< ~200 nt）和总RNA组分（> ~200 nt）。利用miRNeasy 和PAXgene miRNA Kits 纯化得到的RNA适合各种下游应用，如northern blot分析、芯片分析及实时定量RT-PCR。在某些应用（如一些芯片系统）中，小RNA的富集可降低背景，但利用miScript miRNA PCR Arrays 和miScript Primer Assays 的分析则不需要。

从组织和细胞中高效纯化

miRNeasy Mini、Micro和96 Kits 可从组织和细胞中高效纯化RNA，即使所用的起始材料量很少。RNA可从各种组织和细胞中纯化，包括难以裂解的组织。包括miRNA在内的总RNA纯化实现了miRNA与那些目标mRNA、参照看家基因或其它目的mRNA表达水平的直接比较。

从血清或血浆中纯化循环miRNA

循环miRNA可作为检测不同癌症及其他疾病（如糖尿病）的潜在生物标志物。利用从血清或血浆中纯化得到的RNA，研究已发现一些miRNA在一些癌症中的独特表达。miRNeasy Serum/ Plasma Kit 能够从少量的血浆或血清中纯化总RNA。miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control提供了一个合成的加标对照，适用于研究血清或血浆样品时的标准化。纯化得到的RNA之后可用于miScript PCR System，以发现生物标志物。

从FFPE切片中获得高纯度RNA

交联和片段化让FFPE切片的核酸纯化极具挑战性。miRNeasy FFPE Kit 提供了特殊的裂解和孵育条件，对RNA解交联，并有效纯化RNA，同时避免RNA的进一步降解。为了去除痕量的小DNA片段，以免妨碍下游分析（如实时定量RT-PCR），RNA经过DNase 和DNase Booster Buffer 处理，此缓冲液优化了DNase反应。利用miRNeasy FFPE Kit 制备的总RNA随后可用于miScript PCR System，以释放宝贵的表达数据。

欢迎索取miRNA纯化工具的更多资料

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miRNA研究导航（二）：miRNA的定量

miRNA研究导航（三）：miRNA的功能分析

（原文由QIAGEN提供，生物通负责编译和整理）