miRNA研究导航(三):miRNA的功能分析

【字体: 时间:2012年03月26日 来源:生物通

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  miRNA在许多生物过程中扮演了重要角色,包括分化和发育、细胞信号通路以及对感染的反应。大量的证据表明,miRNA表达的失调是一些疾病过程(包括许多癌症)的起因或指示剂。miRNA研究的成功依赖于高性能工具和技术的使用。QIAGEN是一个一站式供应商,满足您在miRNA纯化、定量和功能鉴定上的所有需求。

microRNA(miRNA)是天然存在、长约22个核苷酸的非编码RNA,它们介导了转录后的基因调控。miRNA在许多生物过程中扮演了重要角色,包括分化和发育、细胞信号通路以及对感染的反应。大量的证据表明,miRNA表达的失调是一些疾病过程(包括许多癌症)的起因或指示剂。研究还发现血清和血浆中可以检测到循环miRNA,且它们的表达因疾病而异,这一发现说明循环miRNA的表达特征可作为疾病诊断和预防的生物标志物,具有巨大潜力。

miRNA研究的成功依赖于高性能工具和技术的使用。QIAGEN是一个一站式供应商,满足您在miRNA纯化定量和功能鉴定上的所有需求。欢迎访问QIAGEN的GeneGlobe® 网页(www.qiagen.com/GeneGlobe),订购miRNA特异的产品,并发现大量宝贵的基因信息、通路信息和生物信息学工具。

揭开miRNA生物发生的机制

对于一些研究前体miRNA与成熟miRNA的关系的实验,必须能灵活检测同一cDNA样品中两种类型的miRNA。利用miScript II RT Kit 以miScript HiFlex Buffer 制备的cDNA就具有这种灵活性。在实时定量PCR中,成熟miRNA可利用miScript Primer Assays检测,而前体miRNA可利用miScript Precursor Assays检测。单独的miScript Primer Assays 和miScript Precursor Assays 可在GeneGlobe网页上查找。对于不同miRNA来说,成熟miRNA与前体miRNA的相对水平存在差异。此外,在不同条件下或不同组织中,成熟miRNA可从不同的前体miRNA中表达。

miRNA的功能分析

在功能研究中查明miRNA的作用

miRNA功能研究让您能够鉴定出特定miRNA的目标和作用,分析个别miRNA失调的生物学影响,并验证某个基因是特定miRNA的目标。功能研究可利用miScript miRNA Mimics、miScript miRNA Inhibitors和miScript Target Protectors来开展。目前可订购各种规格和形式,包括管、96孔板和384孔板。

发现miRNA功能的策略:
 利用miScript miRNA Mimics模拟内源miRNA的调控
 利用miScript miRNA Inhibitors抑制内源miRNA
 利用miScript Target Protectors保护单个miRNA目标基因

利用miScript miRNA Mimics来复制内源miRNA的功能

miScript miRNA Mimics是合成的双链RNA,它们在转染进入细胞后模拟了天然存在的miRNA。miScript miRNA Mimics导致基因表达下降,与内源miRNA所观察到的相似。在转染后72小时,基因表达被有效抑制。

利用miScript miRNA Inhibitors来阻遏内源miRNA

miScript miRNA Inhibitors是合成的、化学修饰的单链RNA,它们在转染进入细胞后特异地抑制了miRNA的功能。miScript miRNA Inhibitors经过设计和修饰,能确保内源miRNA的功能被高效抑制。时间进程实验表明,miScript miRNA Inhibitors 在转染后至少96小时内有效。

利用miScript Target Protectors来选择性保护miRNA目标

miScript Target Protectors 是经过修饰的单链RNA,它们能特异干扰miRNA与单个目标之间的相互作用,同时让同一miRNA对其他目标的调控不受影响。在转染之后,miScript Target Protectors与其特异的miRNA结合位点结合,阻止miRNA接近此位点,并防止特定miRNA的基因下调作用。miScript Target Protectors 转染之后是表型或基因表达分析。目标基因表达的增加,信号模式的改变,或表型改变,都能够提供证据,说明研究中的miRNA和目标与感兴趣的通路或表型相关。

欢迎索取miRNA功能分析工具的更多资料

(原文由QIAGEN提供,生物通负责编译和整理)

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