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导语:apoptosis这个词源自希腊语,意思是树叶或花瓣的落下。花落叶落都是自然的生理现象,类似地,细胞凋亡是生物体内绝大多数细胞在一定的发育阶段中都会发生的正常现象。它能及时有效地清除体内过量或有潜在危险性的细胞,用于维持体内各种类型细胞数目的平衡。这种平衡对于促进器官形成以及维持机体内环境的稳定都是至关重要的。



      凋亡早期检测:  


细胞膜的重排发生在凋亡的早期。在许多凋亡细胞中,这种重排导致磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。这一事件可通过Annexin V的染色来检测。Annexin V是一种Ca 2+依赖的磷脂结合蛋白,在Ca 2+存在的情况下,与PS有很高的亲和力,可与凋亡细胞膜上外翻的PS相结合。

早期凋亡检测的新工具

 

特征:
– 细胞膜改变,磷脂酰丝氨酸外翻
– 起始caspase被激活(如caspase-8、caspase-9)
– 线粒体发生改变




      凋亡中期检测  


Caspase是一组天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶,它们在凋亡中发挥重要作用。市场上有很多caspase检测试剂盒,来检测多种caspase的活性。我们既可以通过荧光标记的底物来检测有活性的caspase,也可以利用荧光标记的caspase抑制剂来标记。你还可以通过免疫组化分析来检测切割的底物如PARP。当然,现在还有一些与众不同的新品……

凋亡聚焦:Caspase检测新品

 

特征:
– 效应caspase被激活(如Caspase-3、Caspase-7)
– 细胞内的一些蛋白(死亡底物)被caspases 切割




      凋亡晚期检测  


TUNEL技术的原理是染色体DNA断裂时产生大量的粘性3'-OH末端,而生物素或荧光素标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下掺入到DNA的3'-末端,并通过一定的显色系统使之显示出来。这种方法较电泳法来说更为灵敏,荧光显微镜能检测到单个细胞,流式细胞仪也能检测约100个细胞。市场上的TUNEL分析有很多种,究竟如何选择,且听本文分解。

凋亡聚焦:选择合适的TUNEL分析

 

特征:
– DNA 断裂
– 形成凋亡小体
– 凋亡小体被吞噬细胞吞噬




      In Vivo凋亡检测  


目前市场上凋亡检测的产品真不少,但大多数是针对细胞。若想开展in vivo的凋亡检测,自然要花费一番功夫寻找产品。生物通小编为你搜罗了几个。

凋亡聚焦:in vivo凋亡检测

 


      延伸阅读  


形形色色的凋亡检测
凋亡检测之默克篇
凋亡检测之Promega
在合适的时间点检测凋亡(上)
在合适的时间点检测凋亡(下)

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