胶回收之选全攻略(5)[选购宝典]

【字体: 时间:2006年07月17日 来源:生物通

编辑推荐:

  

胶回收方法之选全攻略

胶回收方法全攻略(2)

胶回收方法全攻略(3)

胶回收之选全攻略(4)

3. Promega Wizard  SV Gel and PCR Clean-up System

品牌:Promega
回收范围:100bp-10kb
推荐指数:

价格指数:(50次包装的试剂盒报价为562元,11元/次,折扣前)

     Promega的产品在进口品牌中一向以价格可亲而著称。这个胶回收试剂盒也不例外。并且生物通编辑部还惊喜的发现这个试剂盒的性能参数好得令人刮目相看!首先是100bp—10kb的回收率高达80%—95%(用于PCR产物回收时适用于100bp—3.2kb的片断);然后是每个柱子的载量高达40ug!低至10ng。可以容纳更多的DNA,满足一次大量片断回收的需求。另外,试剂盒推荐的洗脱体积是50ul,但是如果需要浓度高的回收产物,也可以用不少于15ul的纯水洗脱,而且回收率也不会有太大的影响。回收产物可用于测序、克隆、标记、酶切、体外转录和芯片分析等后继实验。操作也同样非常简单,无非是溶胶吸附、洗涤柱子,最后洗脱。这样,一个试剂盒兼具了多种优点,加上价格相宜,实在是进口产品中的性价比之王。特别是大到9kb的片断,回收率可以达到95%是难得的。

    这个试剂盒使用中值得注意的几个小技巧,比如如果凝胶体积大于350mg,可以分次离心(一个柱子最多可以过相当于3.5g凝胶!就是吸附10次!),而且离心前要让溶胶液在柱子上静置1分钟让其充分吸附。对于超过5kb的片断,溶胶的时候不要振荡,胶较浓的时候溶胶时间要延长保证充分溶解。洗涤2次有助于得到更干净的产物。

 

4、Montage Gel Extraction Kit

品牌:Millipore 
回收范围:100bp-10kb
推荐指数:
价格指数:

特点:

  • 时间短:10分钟spin
  • DNA保存完整
  • 试剂盒包括做为过滤装置的凝胶喷雾器(nbulizer)、离心瓶和TAE gel extraction buffer

使用心得:

    这一款胶回收试剂盒不同于之前提到的凝胶回收方法——Montage利用的是从凝胶中抽取(compression)DNA片段的方法:通过离心力解离凝胶的结构,驱使琼脂糖在gel nebulizer中穿过小孔,这样形成的胶泥就被甩进样品过滤盖中。因此无需其它多余的操作,直接将切下来的凝胶放进去,经过5000g/10min,即可得到回收DNA片段(见下)。

  
回收率见下:

Typical DNA Recoveries from Agarose Gels
DNA Size (bp)
Percent DNA Recoveries
100
78
700
71
1000
77
2027
47
4361
35
9416
32
23130
29

    Millipore先进的膜技术使得Millipore纯化系列其实在自动化高通量领域有相当好的口碑,价格实惠质量可靠。

 

4.经济实惠的国产之选

    在普通级胶回收中应该提及的是一些国产品牌,毕竟在现今胶回收技术成熟并得到了广泛应用的基础上,一些国产品牌也提供了经济实惠的胶回收试剂盒,比如天根,杭州维特洁,深圳天地人,等等。低廉的价格,使得平时用起来也挥洒自如不心疼,如果说进口产品打开的实验自由化之门,那么跟进的国产产品则实实在在让国内科研经费紧张的实验室也能分享简化实验的快乐,穷人的孩子也有春天。在国内,价格还是最有杀伤力的。天为时代已经被Qiagen收购并改名天根,而在国产品牌中口碑很好的维特洁也被Axygen收购。生物通在这里列举了部分国产产品的对比,当然,要注意参数是厂家提供的,标准有差别的。

品牌 天根(天为时代) 杭州维特洁(已被Axygen收购) 深圳天地人 Omega
产品 普通琼脂糖凝胶回收试剂盒 AxyPrep DNA凝胶回收试剂盒 小量胶回收试剂盒 琼脂糖凝胶回收试剂盒
回收片段大小 100bp-10kb 75bp-10kb 50bp-20kb
回收率 >80%(100 bp的DNA片段回收率为50 %以上) 60—85%(根据长度不同) 85%
产品描述 可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统,从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。 采用优化的试剂和方便的DNA制备管,适合从各种电泳凝胶(TAE或TBE)中提取多至8  ug线性DNA。独特的缓冲液体系,在保证凝胶完全融化的同时,防止了DNA片段的损坏和降解。纯化后的DNA保持完整的生物活性,适用于多种用途:如连接、体外转录、PCR、测序、微注射等分子生物学研究。   应用: 酶切,连接,PCR等用途
样品: 从琼脂糖凝胶中回收DNA片段
时间: 15分钟 
结合能力:25μg
洗脱体积:30-50μ
价格 50包装270元
200包装980元

约5元/反应

 

50包装350元
250包装1570元

约7元/反应

 

50包装160元
100包装240元
200包装380元
500包装750元

约3元/反应

50包装299
200包装1100

约6元/反应(Q-spin)

 

(待续,大片断和小片断回收攻略/丙烯酰胺凝胶回收)生物通技术专题文章
  ·胶回收之选全攻略(6:大片断的难题)
  ·胶回收之选全攻略(7)

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